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使用賽默飛VeritiPro 96 PCR儀時,需注意以下關(guān)鍵細節(jié)以確保實驗的準(zhǔn)確性和儀器的長期穩(wěn)定性:
一、儀器放置與環(huán)境要求
1、將PCR儀放置在平穩(wěn)、干燥、通風(fēng)良好的位置,遠離熱源和強電磁干擾源,避免影響溫控系統(tǒng)和電子元件。
2、環(huán)境溫度建議保持在18~35℃,濕度控制在60%左右,并配備功率≥3000W的穩(wěn)壓電源。
3、儀器之間應(yīng)保持50cm以上距離,以減少相互干擾。
二、操作前的準(zhǔn)備
1、檢查反應(yīng)管或96孔板是否密封良好,避免樣本泄漏影響實驗結(jié)果。
2、確保試劑在有效期內(nèi),儲存條件符合要求(如避光、低溫等)。
3、加樣時避免產(chǎn)生氣泡,使用同一吸液器和槍頭以減少交叉污染。
4、若樣本量較少,可在樣品槽兩側(cè)各加兩排8聯(lián)管,以保持熱蓋平整,提高加熱均勻性。
三、程序設(shè)置與運行
1、程序設(shè)計完成后,務(wù)必仔細檢查溫度、時間和循環(huán)次數(shù),避免參數(shù)錯誤導(dǎo)致實驗失敗。
2、梯度PCR設(shè)置時,相鄰梯度溫度差不得超過5℃。
3、運行過程中切勿隨意打開儀器門,以免破壞溫度平衡。
4、對于短片段擴增(100~300bp),可采用二溫度點法(如94℃變性,65℃退火/延伸),以提高效率。
四、使用后的清潔與維護
1、實驗結(jié)束后,及時用95%乙醇或中性肥皂水清潔樣品槽和熱蓋,避免殘留核酸污染。
2、運行50℃程序5~10分鐘,使殘留液體揮發(fā)。
3、長期不使用時,每隔半個月開機自檢20分鐘,防止元件老化。
通過遵循以上細節(jié),可確保VeritiPro 96 PCR儀的高效運行,同時提高實驗數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性。如需更詳細的操作指南,可參考儀器說明書或相關(guān)技術(shù)文檔。