在賽默飛QuantStudio 5實時熒光定量PCR實驗中，完成當(dāng)前步驟后，下一步取決于你實驗的具體階段。以下是常見實驗流程及下一步操作建議：

一、已完成QuantStudio 5 PCR反應(yīng)體系配制

1、將反應(yīng)板/管放入QuantStudio 5儀器中，確保正確對齊。

2、在軟件（QuantStudio Design & Analysis Software）中設(shè)置實驗參數(shù)（如循環(huán)條件、熒光通道等）。

3、點擊“運行實驗"開始PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)采集。

二、QuantStudio 5 PCR運行已完成

1、數(shù)據(jù)分析：

檢查擴(kuò)增曲線（S形曲線是否正常）。

計算Ct值（用于定量分析）。

若使用SYBR Green，進(jìn)行熔解曲線分析（檢查擴(kuò)增特異性）。

2、數(shù)據(jù)導(dǎo)出：

將結(jié)果保存為Excel、PDF或RDML格式（符合MIQE指南）。

三、數(shù)據(jù)分析已完成

儀器維護(hù)：

清潔反應(yīng)模塊（用無水乙醇擦拭孔位）。

檢查光學(xué)系統(tǒng)是否污染（必要時校準(zhǔn)）。

定期（每3-6個月）進(jìn)行溫控校準(zhǔn)。

四、實驗出現(xiàn)異常

1、排查問題：

檢查熒光信號是否正常（可能需清潔光學(xué)模塊）。

確認(rèn)溫度準(zhǔn)確性（必要時校準(zhǔn)）。

檢查試劑是否降解或污染。

2、聯(lián)系技術(shù)支持（如賽默飛售后服務(wù)）

五、長期維護(hù)建議

1、定期更新軟件版本。

2、每1-2年由專業(yè)工程師進(jìn)行全面檢修。